紫外可見分光光度計是根據物質分子對波長為200~760nm的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結構分析儀器。操作簡單、準確度高、重現性好。波長長的光線能量小,波長短的光線能量大。
在紫外可見分光光度計中,常見的光源有氙燈和鎂燈等,而樣品的光譜則可以通過單光束模式或雙光束模式進行測量。具體來說,單光束模式指的是光線經過樣品后直接進入光譜儀進行測量,而雙光束模式則是將光線分成兩束,一束經過樣品,另一束則經過一個空白的參比通道,再將兩種光線的吸光度進行比較。此外還可以選擇不同的檢測器,如光電離檢測器和光電二極管檢測器等,以便對不同波長范圍的光進行測量和分析。
在使用紫外可見分光光度計時,需要注意以下一些操作技巧:
1、樣品的制備:樣品的制備要仔細、準確,避免出現誤差。通常需要準確稱量或配制樣品,以保證測量的準確性和可重復性。
2、波長的選取:在選擇測量波長時,應根據樣品的性質和需要進行選擇,避免測量范圍過寬或過窄。
3、參比溶液的配制:在使用雙光束模式時,需要準備空白參比溶液,以便和樣品進行比較。參比溶液應根據樣品性質選擇適當的溶劑和波長。
4、光路的調整:在使用單光束模式時,需要調整光路,使光線準確進入光譜儀。此外,還需要調整光強、波長、積分時間等參數,以確保測量的準確性和可重復性。